豬肉中四種硝基呋喃類代謝物殘留量的測定液相色譜串聯質譜法

更新時間：2012-05-18

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一．實驗目的

本文使用天津博納艾杰爾科技有限公司的Cleanert PEP-2固相萃取柱、Venusil MP C18色譜柱和AB SCIEX公司的API 4000+質譜儀，遵照中華人民共和國國家標準《豬肉、牛肉、雞肉、豬肝和水產品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定（GB/T 20752-2006）》提供的方法，檢測豬肉中的4種硝基呋喃類代謝物殘留。

二．實驗方法

2.1.樣品信息

2.2.樣品提取

稱取豬肉樣品2g（到0.01g），置于50m棕色離心管中，加入15ml甲醇-水混合溶液（v:v=2：1），均質1min，8000r/min離心5min 吸取上清液倒掉，殘渣中加入2ppb的硝基呋喃類代謝物混合標準品各1ml，混合均勻。

2.3.水解和衍生（注意避光）

向棕色離心管中加入20ml 0.2mol/l的鹽酸溶液，渦旋1min使之混合均勻，之后加入0.3ml濃度為0.05mol/L的2-硝基苯甲醛，混勻，于37℃溫水中避光衍生16小時。

2.4.凈化處理

將衍生后的樣品冷卻至室溫，加入5ml 0.1mol/l的磷酸氫二鉀，并用1 mol/l的氫氧化鈉溶液調PH約為7.4，混合均勻。之后用8000r/min離心10min,以小于2ml/min的流速過PEP-2小柱（規格為60mg/3ml，用5ml甲醇、5ml水活化），并用10ml的水洗滌固相萃取小柱，然后負壓抽干柱子15min。用5ml乙酸乙酯洗脫于20ml棕色瓶中，并在40℃下氮氣吹干。

用樣品定容溶液（10ml乙腈，0.3ml的乙酸用水稀釋至100ml）定容至1ml，充分溶解，并用0.2um濾膜過濾。

2.5.檢測方法

色譜柱：Vesusil^® MP-C18（2.1×150mm，5um，100Å）

質譜儀：API 4000⁺

流動相：A:0.1%甲酸的水溶液

B:0.1%甲酸的乙腈溶液

流速：0.2mL/min

表1 梯度洗脫條件

時間（min）	A（%）	B（%）
0	80	20
1	80	20
3	50	50
7	25	75
7.1	5	95
10	5	95
10.1	80	20
16	80	20

進樣體積：5μL

離子源：電噴霧（ESI），正離子模式

掃描方式：多反應監測（MRM）

表2 質譜儀離子源參數

Source/Gas
Collision Gas（CAD）	6
Curtain Gas（CUR）	15
Ion Source Gas 1（GS 1）	50
Ion Source Gas 2（GS 2）	50
Ion Spray Voltage（IS）	5500
Temperature（TEM）	600
Interface Heater（ihe）	On

表3 4種硝基呋喃待測物母離子和子離子參數表

物質名稱	保留時間（min）	監測離子對	DP	EP	CE	CXP
SEM	8.10	209.1/166.1	51	10	17	10
SEM	8.10	209.1/192.1	51	10	17	10
AHD	8.30	249.2/134.1	61	10	20	10
AHD	8.30	249.2/104.1	66	10	31	10
AOZ	8.89	236.2/134.1	61	10	20	10
AOZ	8.89	236.2/104.1	56	10	31	10
AMOZ	3.12	335.3/291.2	46	10	19	10
AMOZ	3.12	335.5/128.1	46	10	19	10

圖1 4種硝基呋喃代謝物總離子

圖2 SEM（209/166）質譜圖

圖3 AOZ（236/134）質譜圖

圖4 AHD（249/134）質譜圖

圖5 AMOZ（335/291）質譜圖

三．實驗結果

0.5ppb豬肉基質加標回收實驗結果：

表4 豬肉中0.5ppb加標回收實驗結果

名稱	1#	2#	3#	平均回收率	RSD
AMOZ	109.43%	97.84%	109.75%	105.67%	6.42%
SEM	91.81%	88.91%	88.22%	89.65%	2.12%
AHD	80.68%	82.11%	77.25%	80.01%	3.12%
AOZ	83.94%	80.70%	80.85%	81.83	0.02%

四．實驗結論

Agela Cleanert^® PEP-2、Agela Venusil^® MP C18和AB SCIEX公司的API 4000+質譜儀用于豬肉中4種硝基呋喃代謝物的檢測，性能良好，符合國標文件的要求。

訂貨信息

產品名稱	規格/包裝	訂貨號	定價（元）
Cleanert^® PEP-2	60mg/3mL，50支/包	PE0603-2	1035.00
Venusil^® MP C18	2.1×150mm，5um，100Å；1支	VA951502-0	3200.00

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豬肉中四種硝基呋喃類代謝物殘留量的測定 液相色譜串聯質譜法

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